Detta nya kapitel av den episka sagan är baserad på Frank Millers serieroman Xerxes och berättas i samma hisnande visuella stil som dundersuccén "300" och tar handlingen till ett nytt slagfält – på havet – då den grekiske generalen Themistokles försöker ena hela Grekland genom att leda angreppet som kommer att förändra krigets förlopp. "300: Rise of an Empire" ställer Themistokles mot de enorma invaderande persiska styrkorna ledda av den till gud förvandlade Xerxes och Artemisia, den hämndlystne befälhavaren över den persiska flottan.