I Karsten och Petra på safari reser de två bästa vännerna till Afrika tillsammans med Petras mamma, morfar och de trofasta följeslagarna Fröken Kanin och Lejonungen. På djursjukhuset i Camp Eden träffar Karsten och Petra den fem år gamla Tiri och hennes gosedjur Turte. Tiri tar med sina nya vänner på safari och på turen hittar de Leo, en lejonunge som har förlorat sin mamma. Tillsammans med morfar åker Karsten och Petra på en expedition för att försöka hitta lejonmamman, men istället hittar de en lejonfälla.